פלואורשאין דיאצטט(FDA), עם הנוסחה המולקולרית C24H16O7, מספר CAS 596-09-8, משקל מולקולרי 416.380, מופיעה בדרך כלל כאבקה צהובה בהירה עם גבישיות טובה. המסיסות באצטון גבוהה יחסית ומגיעה עד 25mg/mL. עם זאת, יש מידע מוגבל על מסיסותו בממסים אחרים, אך נהוג להאמין שמסיסותו מושפעת מקוטביות הממס ומהטמפרטורה. זוהי תרכובת ליפופילית שיכולה לחדור לממברנת התא בתאים חיים ולהידרליזה כמצע אסטראז לייצור פלואורסצנטי פלואורסצנטי. מאפיין זה הופך אותו ליישום נרחב בתחומים כגון זיהוי כדאיות תאים, זיהוי חיידקים והערכת פעילות אנזים. הוא אינו פולט אור בעצמו, אך הפלואורסצאין המיוצר בהידרוליזה בתאים חיים יכול לפלוט פלואורסצנטי ירוק. אורכי הגל העירור והפליטה שלו הם 488 ננומטר ו-530 ננומטר, בהתאמה, מה שהופך אותו לבדיקה פלורסנטית נפוץ בציטומטריית זרימה ומכשירי זיהוי ביולוגיים אחרים.
|
|
|
|
נוסחה כימית |
C24H16O7 |
|
מסה מדויקת |
416 |
|
משקל מולקולרי |
416 |
|
m/z |
416 (100.0%), 417 (26.0%), 418 (2.7%), 418 (1.4%) |
|
ניתוח אלמנטים |
C, 69.23; H, 3.87; O, 26.90 |
פלואורסין דיאצטט(FDA) הוא חומר כימי בשימוש נרחב בביולוגיה, רפואה, ניטור סביבתי ותחומי תעשייה.
ביולוגיה ומחקר רפואי
1. גילוי כדאיות ופעילות של תאים
(1) ניתוח ציטומטריית זרימה: כמצע אסטראז, הוא יכול לחדור לתאים חיים דרך קרום התא ולהיות הופך להידרוליזה לפלואורסין על ידי אסטראזות בתוך התאים, ולפלוט פלואורסצנטי ירוק. לכן, הוא משמש לעתים קרובות ב-flow cytometry כדי לזהות את כדאיות התא ולהעריך את מצב ההישרדות של תאים על ידי מדידת עוצמת הקרינה.
(2) הערכת ציטוטוקסיות: במחקרי ציטוטוקסיות, ניתן להשתמש בה כדי להעריך את ההשפעות של תרופות, כימיקלים וכו' על פעילות התא. על ידי השוואת השינויים בעוצמת הקרינה של תאים לפני ואחרי הטיפול, ניתן לקבוע האם לחומרים אלו יש השפעות רעילות על התאים.
2. איתור וזיהוי חיידקים
(1) איתור פעילות מיקרוביאלית: ניתן להשתמש כדי לזהות פעילות מיקרוביאלית בסביבה, כגון פעילות מיקרוביאלית כוללת באדמה. על ידי מדידת עוצמת הקרינה המיוצרת על ידי הידרוליזה של ה-FDA על ידי מיקרואורגניזמים, ניתן להעריך את רמת הפעילות של מיקרואורגניזמים.
(2) איתור חיידקים ווירוסים: במחקר ביולוגי ורפואי ניתן להשתמש בו גם לזיהוי נוכחות של חיידקים ווירוסים. באמצעות טכניקות צביעה או תיוג ספציפיות, ניתן להשיג זיהוי וספירה מהירה של חיידקים ווירוסים.
3. סמנים ביולוגיים וזיהוי פעילות האנזים
(1) הערכת פעילות האנזים: יכול לשמש כמצע לאנזימים שונים להערכת פעילותם. לדוגמה, הוא יכול לשמש כמצע ניאון לגלוטתיון אנושי S-transferase Pi (hGTP1-1), וניתן להעריך את פעילותו על ידי מדידת עוצמת הקרינה.
(2) איתור סמנים ביולוגיים: באבחון מחלה, ניתן להשתמש בו כדי לזהות נוכחות ורמה של סמנים ביולוגיים מסוימים, כגון סמנים לתאים סרטניים. ניתן להשיג אבחון מוקדם וניטור טיפול של מחלות באמצעות שיטות זיהוי ספציפיות.
ניטור סביבתי
1. ניטור איכות המים
(1) איתור מיקרואורגניזמים במים: יכול לשמש לזיהוי מיקרואורגניזמים במים, כגון ציסטות Giardia חיות. על ידי מדידת עוצמת הקרינה המיוצרת על ידי הידרוליזה של ה-FDA על ידי מיקרואורגניזמים בדגימות מים, ניתן להעריך את הזיהום המיקרוביאלי של איכות המים.
(2) הערכת חיוניות אצות: בניטור סביבתי, ניתן להשתמש בה גם כדי להעריך את מצב החיוניות של אצות במקווי מים.
על ידי מדידת יכולת הספיגה וההמרה של תאי אצות כלפי ה-FDA, ניתן לקבוע את מצב הצמיחה ואיכות הסביבה האקולוגית של אצות.
2. ניטור קרקע
פעילות מיקרוביאלית בקרקע: כפי שהוזכר קודם לכן, ניתן להשתמש בה כדי למדוד את כלל הפעילות המיקרוביאלית בקרקע. יש לכך משמעות רבה להערכת מצב הבריאות ורמת הפוריות של מערכות אקולוגיות בקרקע.
יישומים תעשייתיים
1. ציוד לד
חומר פלורסנטי: ניתן להשתמש בו כחומר ניאון במכשירי LED כדי להמיר ולהתאים את צבע האור על ידי קליטת האור הנפלט מה-LED ופליטת צבעים שונים של פלואורסצנטיות.
2. סימון שמן
חומר תיוג פלורסנטי: בתעשיית הנפט, ניתן להשתמש בו כחומר תיוג פלורסנטי. על ידי הוספתו למוצרי נפט כדי להעניק להם תכונות פלואורסצנטיות, הוא מקל על זיהוי ולוקליזציה בתהליכי איתור דליפות, מעקב והתאוששות.
יישומים אחרים
1. חישת טמפרטורה במחקר רפואי
בדיקה רגישה לטמפרטורה: תכונות הקרינה רגישות לטמפרטורה, ולכן היא יכולה לשמש כבדיקה רגישה לטמפרטורה במחקר רפואי. על ידי מדידת שינויים בעוצמת הקרינה, ניתן להשיג-ניטור בזמן אמת של שינויי טמפרטורה בסביבה in vivo או in vitro.
2. טיפול במחלות איסכמיות
טיפול באיסכמיה: מחקרים הראו שניתן להשתמש בו לטיפול במחלות איסכמיות במצבים מסוימים. באמצעות המנגנון הביוכימי הספציפי שלו, הוא יכול לקדם התאוששות ותיקון של רקמות איסכמיות.
הסינתזה שלפלואורססאין דיאצטט(FDA) הוא תהליך כימי מורכב אך חשוב, ולמוצריו יש יישומים רחבים בביולוגיה, רפואה, ניטור סביבתי ותחומים נוספים.
הסינתזה של ה-FDA מבוססת בדרך כלל על fluorescein או תרכובות מבשרות שלו, אשר מציגות קבוצות חומצה אצטית באמצעות תגובות אסטריפיקציה. תגובת אסטריפיקציה היא תגובת סינתזה אורגנית בשימוש נפוץ, הכוללת בדרך כלל תגובה של חומצה קרבוקסילית ואלכוהול בנוכחות זרז חומצה לייצור אסטרים. בסינתזה, fluorescein או קדם שלו (כגון diacetylfluorescein) מגיבים עם אנהידריד אצטית כדי לייצר את החומר.
1. הכנת חומר גלם
פלואורסין:
כחומר מוצא, ניתן לסנתז את הפלוארסין או לרכוש בשיטות שונות.
אנהידריד אצטי:
כסוכן אצילציה בתגובות אסטריפיקציה, יש להבטיח טוהר ויציבות.
זרזים:
כגון פירידין וחומצה גופרתית, משמשים לקידום תגובות אסטריפיקציה.
מֵמֵס:
כגון אתנול נטול מים, DMSO וכו ', המשמשים להמסת מגיבים ומוצרים, מקדמים את ההתקדמות האחידה של התגובה.
2. תגובת אסטריפיקציה
(1) תנאי תגובה:
מבוצע בדרך כלל בטמפרטורה מסוימת (כגון 90-120 מעלות צלזיוס) ובלחץ כדי להבטיח ערבוב יסודי ותגובה של מגיבים.
(2) שלבי פעולה:
ממיסים פלואורסין בכמות מתאימה של ממס, מוסיפים אנהידריד אצטי וזרז, מערבבים באופן שווה, ולאחר מכן מחממים ורפלוקס למשך תקופה מסוימת (כגון מספר שעות). נדרש ניטור רציף של התקדמות התגובה במהלך תהליך התגובה כדי להבטיח תגובה מלאה.
(3) עיבוד לאחר:
לאחר השלמת התגובה, המוצר הגולמי מתקבל באמצעות שלבים כגון סינון, כביסה וייבוש. לאחר מכן, הטיהור בוצע באמצעות שיטות כגון גיבוש מחדש וכרומטוגרפיה של עמודות כדי להשיג FDA בטוהר- גבוה.
3. דוגמאות סינתזה ספציפיות
(1) הכנת פלואורססאין:
ראשית, fluorescein מוכנה באמצעות סדרה של תגובות כימיות. תהליך זה עשוי לכלול שלבים כגון התכה, הוספת אבץ כלוריד, תגובה, התמצקות, קירור, טיפול בחומצה, כביסה, ייבוש וכו'.
(2) תגובת אסטריפיקציה:
קח כמות מסוימת של פלואורססאין (כגון 6.3 גרם, כ-0.02 מול), הוסף כמות מתאימה של אנהידריד אצטי (כגון 16 מ"ל, בערך פי 5 מהכמות התיאורטית) וזרז (כגון פירידין), מחממים לטמפרטורה מסוימת (כגון 90 מעלות צלזיוס) באמבט שמן, מערבבים ומערבבים באופן אחיד. לאחר מכן העלו את הטמפרטורה בהדרגה לטמפרטורה גבוהה יותר (כגון 120 מעלות צלזיוס) והגיבו למשך פרק זמן (כגון 7 שעות).
(3) עיבוד לאחר:
לאחר השלמת התגובה, מצננים באופן טבעי לטמפרטורת החדר ומסננים לקבלת המוצר הגולמי. שטפו וייבשו את המוצר הגולמי כדי להשיג את המוצר המוגמר.
פעולה בטוחה:
במהלך תהליך הסינתזה מעורבים כימיקלים רעילים ומזיקים כמו אנהידריד אצטית ופירידין. יש צורך לפעול במנדף וללבוש ציוד מגן מתאים (כגון משקפי מגן, מעילי מעבדה, כפפות וכו').
בקרת מצב התגובה:
תגובת האסטריפיקציה רגישה לטמפרטורה, לחץ, זמן תגובה ותנאים אחרים, ונדרשת בקרה קפדנית כדי להבטיח תגובה חלקה ואיכות המוצר.
שלבי טיהור:
שלבי הטיהור במהלך-העיבוד לאחר העיבוד הם חיוניים להשגת מוצרים ברמת טוהר- גבוהה. יש צורך לבחור שיטת טיהור מתאימה בהתאם למצב בפועל ולערוך טיפול כביסה וייבוש מספק.
על מנת לשפר את יעילות הסינתזה וטוהר המוצר, ניתן לייעל את שיטת הסינתזה. לְדוּגמָה:
(1) שיפור זרזים:
בחירת זרזים מתאימים יכולה להגביר את קצב ותפוקת תגובות האסטריפיקציה.
(2) ייעול תנאי התגובה:
על ידי התאמת טמפרטורת התגובה, הלחץ, הזמן ותנאים אחרים, ניתן לשפר עוד יותר את הטוהר והתפוקה של המוצר.
(3) שיפור שיטות טיהור:
אימוץ שיטות טיהור יעילות יותר (כגון הפרדה כרומטוגרפית, הפרדת ממברנה וכו') יכול לשפר את הטוהר וקצב ההתאוששות שלפלואורסין דיאצטט.
מהן תופעות הלוואי של החומר הזה?
בדיקת כדאיות תאים:
ה-FDA נמצא בשימוש נרחב לבדיקת כדאיות תאים מכיוון שהוא יכול להיכנס לתאים חיים ולהתפרק בתוך התאים כדי לייצר פלואורסצנטי, מה שמאפשר הערכה ויזואלית של מצב הכדאיות של התא.
רעילות נמוכה:
בריכוזי שימוש רגילים, ל-FDA יש רעילות נמוכה לתאים ולרוב אין לו השפעות שליליות משמעותיות על התאים.
נזק לתא:
אם ריכוז ה-FDA גבוה מדי או זמן העיבוד ארוך מדי, זה עלול לגרום נזק מסוים לתאים. ייתכן שהסיבה לכך היא ההשפעה של ה-FDA או תוצרי הפירוק שלו על החדירות של ממברנות התא או על חילוף החומרים הפנימי של התאים.
תגובות אלרגיות:
עבור אנשים מסוימים, ה-FDA עלול לגרום לתגובות אלרגיות. תגובה זו קשורה בדרך כלל למבנה הגוף ולמצב מערכת החיסון של האדם, אך ההסתברות להתרחשות נמוכה יחסית.
זיהום סביבתי:
ה-FDA צריך לטפל בו כראוי לאחר השימוש כדי למנוע זיהום פוטנציאלי לסביבה ולמערכת האקולוגית.
למרות שה-FDA עצמו אינו חומר כימי מסוכן ביותר, טיפול לא נכון בכל חומר כימי עלול להשפיע לרעה על הסביבה.
בקרת ריכוז:
בעת שימוש ב-FDA לבדיקת כדאיות תאים, יש לשלוט בקפדנות על הריכוז וזמן העיבוד כדי למנוע נזק מיותר לתאים.
הגנה אישית:
על המפעילים ללבוש ציוד מגן אישי מתאים כגון כפפות, מסכות ומשקפי מגן בעת השימוש ב-FDA כדי למנוע מגע ישיר עם העור, העיניים או דרכי הנשימה.
פינוי פסולת:
לאחר השימוש, יש להשליך כראוי את פתרונות ה-FDA בהתאם לתקנות הרלוונטיות כדי להבטיח שהם לא גורמים לזיהום הסביבה.
שאלות נפוצות
מה זה דיאצטט פלואורססאין?
Fluorescein diacetate (FDA) מוגדר כאסטר חומצת שומן שהופך לפלורוסנטי לאחר הידרוליזה אנזימטית על ידי אצטילטרנספראזות בתאים מיקובקטריאליים חיים, המאפשר זיהוי של חיידקים קיימא במבחני כדאיות.
למה משמש פלואורסין?
נעשה שימוש בהזרקת פלואורשאיןכדי לעזור לחלקים מסוימים של העין (למשל, רשתית, קשתית) להיות גלויים יותר במהלך פרוצדורות רפואיות בעיניים. תרופה זו תינתן רק על ידי או בפיקוח ישיר של הרופא שלך. מוצר זה זמין בצורות המינון הבאות: תמיסה.
מהו ניתוח הפלואורסטין דיאצטט?
Fluorescein diacetate (FDA) הואמשמש לקביעת פעילות מיקרוביאלית. קביעת פעילות זו יכולה להתבצע במסגרת חפצי מחקר שונים תוך שימוש באדמה, זבל, כבול וכו'. שיטה זו מבוססת על תגובת הידרוליזה של הפיכת פלורסטין דיאצטט (FDA) לפלואורסטין.
תגיות פופולריות: fluorescein diacetate cas 596-09-8, ספקים, יצרנים, מפעל, סיטונאי, קנייה, מחיר, בתפזורת, למכירה