Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd היא אחת היצרניות והספקיות המנוסות ביותר של הזרקת ניקוטינמיד ריבוזיד בסין. ברוכים הבאים להזרקת ניקוטינמיד ריבוזיד בתפזורת בתפזורת גבוהה למכירה כאן מהמפעל שלנו. שירות טוב ומחיר סביר זמינים.
הזרקת ניקוטינמיד ריבוסידהוא פורמולציה המזריקה ישירות לגוף Nicotinamide Riboside (NR) במטרה להגביר במהירות את ריכוז ה-NR בדם וברקמות, ובכך להגביר את רמת ה-Nicotinamide adenine dinucleotide (NAD ⁺) בתאים. זוהי נגזרת של ויטמין B3 (ניאצין) ומבשר של NAD ⁺, אשר ניתן להשלים דרך הפה או בהזרקה. צורת ההזרקה שלו היא להמיס NR במי מלח פיזיולוגיים או בממיסים מיוחדים, ולתת אותו תוך ורידי (IV) או תוך שרירי (IM) כדי לעקוף את מחסום הספיגה דרך הפה של מערכת העיכול ולהשיג זמינות ביולוגית יעילה יותר.
יחד עם זאת, החברה שלנו מספקת לא רק אבקות טהורות, אלא גם טבליות והזרקות. במידת הצורך, אנא אל תהסס לפנות אלינו בכל עת.
המוצרים שלנו
 |
 |
 |
 |
Nicotinamide Riboside Chloride COA
פיתוח הזרקת ניקוטינמיד ריבוסיד על בסיס אנזים היברידי של יונקים ארכאאה
Nicotinamide Riboside (NR), כמבשר מפתח של NAD ⁺ (nicotinamide adenine dinucleotide), הפך לנושא חם במחקר ביו-רפואי בשל הפוטנציאל שלו לאנטי-להזדקנות, לשיפור מטבולי ולהגנה עצבית. עם זאת, הזמינות הביולוגית של NR מוגבלת על ידי יעילות הספיגה במערכת העיכול וחילוף החומרים במעבר ראשון, בעוד שפורמולציות מסורתיות להזרקה מתמודדות עם בעיות כמו יציבות לקויה ומחצית חיים קצרה. בשנים האחרונות, פריצות דרך בטכנולוגיית הביולוגיה הסינתטית סיפקו רעיונות חדשים לפתרון בעיה זו: על ידי בניית יונקים ארכאיים ויצירת אנזימים היברידיים ויצירת אנזימים היברידיים ויצירת אנזימים חדשים. דור שלהזרקת ניקוטינמיד ריבוסידפתרונות.
בסיס מדעי: השלמה של אנזימים ארכאים ויונקים
יכולת הסתגלות סביבתית קיצונית של אנזימים ארכאיים
ארכאאה היא סוג של אורגניזם פרוקריוטי שחי בסביבות קיצוניות כמו טמפרטורה גבוהה, מלח גבוה וחומצה חזקה. למערכת האנזימים שלו יציבות ייחודית ויעילות קטליטית. לְדוּגמָה:
ה-NR kinase (NRK) של ארכאאה היפרתרמופילית (כגון Pyrococcus furiosus) נשאר פעיל ב-80 מעלות ויש לו זיקה למצע NR שהיא יותר מפי 10 מזו של NRK של יונקים.
ה-NMN adenosyltransferase (NMNAT) של ארכאה סובלנית למלח, כגון Halobacterium salinarum, יכול לזרז את ההמרה של NMN ל-NAD ⁺ בתנאי מלח גבוהים ואינו מתפרק בקלות על ידי פרוטאזות בסרום יונקים.
ויסות מדויק של אנזימי יונקים
למערכת האנזים של היונקים יש סגוליות רקמה קפדנית ויכולת ויסות מטבולית:
NRK1/2 אנושי: NRK1 מתבטא מאוד בכבד ובשריר השלד, האחראי על הזרחון הראשוני שלהזרקת ניקוטינמיד ריבוסיד; NRK2 מתבטא בעיקר במוח ומשתתף בסינתזה של NAD ⁺ עצבית.
SIRT1-3 deacetylase: הוא מווסת את חילוף החומרים באנרגיה, תיקון DNA ותגובה דלקתית על ידי חישת NAD ⁺, ויוצר לולאת וויסות משוב שלילי.
היגיון עיצובי של אנזימים הטרוזיגוטיים
על ידי שילוב היציבות/היעילות הקטליטית של אנזימים ארכאיים עם הספציפיות הרגולטורית של אנזימי יונקים, ניתן לבנות אנזים היברידי "תפקודי כפול":
היתוך תחום מבני: לדוגמה, התחום הקטליטי של P. furiosus NRK מתמזג עם פפטיד אות לוקליזציה של הממברנה של NRK1 אנושי כדי להשיג זרחון מהיר של NR ליד קרום התא.
ויסות קונפורמציה משתנה: הצגת תחום הקישור NAD ⁺ של יונק SIRT1 כדי לווסת באופן דינמי את הפעילות של אנזימים הטרוזיגוטיים על ידי רמות NAD ⁺ תוך תאי, תוך הימנעות מצריכה מופרזת של NR.
נתיב טכני: מעיצוב אנזים ועד פיתוח הזרקה
עיצוב רציונלי של אנזימים הטרוזיגוטיים
בחירת אנזים יעד
אנזימי ליבה: NRK (מזרז NR → NMN) ו-NMNAT (מזרז NMN → NAD ⁺), מכיוון שהם קובעים ישירות את יעילות ההמרה של NR.
אנזימים עזר, כגון NAMPT (nicotinamide phosphoribosyltransferase), משמשים לשחזור ניקוטינאמיד (NAM) וסינתזה של NMN, ויוצרים מערכת מיחזור NR.
פיצול דומיין ושילוב מחדש
ניקח כדוגמה סינתזה של NRK:
קטע Archaea: שיבוט את הגן NRK מהגנום P. furiosus, תוך שמירה על תחום ה-ATP המקשר שלו ושלישיית הקטליטי שלו (כגון K123-D245-E278).
חלק יונקים: חלץ את התחום הטרנסממברני הטרמינלי N-(TM, 1-50 aa) ואות הפירוק של PEST מסוף C-(400-450 aa) של NRK1 אנושי כדי לשלוט על לוקליזציה של ממברנות האנזים ובזמן מחצית החיים.
פפטיד מקשר גמיש: הכנסת קישור (GGGGS) ∝ להפחתת הפרעה סטרית בין תחומים מבניים.
אופטימיזציה אבולוציונית מכוונת
על ידי שימוש ב-PCR נוטה לטעויות ומיון תאים מופעל פלואורסצנציה (FACS), נבדקו המוטנטים הבאים:
יציבות מוגברת של-טמפרטורה גבוהה: החדרת מוטציית T215I לכיס הקטליטי של P. furiosus NRK האריכה את מחצית החיים- של האנזים משעתיים ל-12 שעות ב-37 מעלות.
הרחבת סגוליות המצע: החדרת המוטציה F198L של NRK2 אנושית לאנזים ההטרוזיגוטי, מה שמאפשר לו להשתמש בו זמנית ב-NR ובניקוטינט ריבוז (NaR) כמצעים.
ביטוי וטיהור של אנזימים הטרוזיגוטיים
בחירת מערכת ביטוי
מערכת Pichia pastoris: מתאימה לביטוי הפרשה, יכולה למנוע זיהום אנדוטוקסין, אך דורשת אופטימיזציה של תנאי אינדוקציה של מתנול כדי למנוע פירוק על ידי אנזימים הטרוזיגוטיים.
מערכת תאי יונק (HEK293): היא יכולה להשיג שינוי גליקוזילציה נכון ולשפר את היציבות בסרום של אנזימים, אך העלות גבוהה יחסית.
אסטרטגיית טיהור
כרומטוגרפיה זיקה: הוסף את תג His ₆ לקצה ה-C- של האנזים ההטרוזיגוטי וטהר עם שרף Ni NTA.
כרומטוגרפיה של חילופי יונים: הפרדה נוספת של גרסאות מטען שונות באמצעות עמודת Mono Q.
כרומטוגרפיה של אי הכללת גודל (SEC): הסר אוליגומרים כדי להשיג אנזימים הטרוזיגוטיים מונו-פזרים.
פיתוח תכשירי אנזים היברידיים
שיפור יציבות
שינוי כימי: פוליאתילן גליקול (PEG) משמש לשינוי שאריות הליזין על פני האנזים ההטרוזיגוטי, ומאריך את מחצית החיים שלו בסרום (משעתיים ל-24 שעות).
אנקפסולציה ננו: טעינת אנזימים היברידיים לליפוזומים או ננו-חלקיקים פולימריים כדי להגן עליהם מפני פירוק פרוטאז.
עיצוב הזרקה
הזרקת אבקה מיובשת בהקפאה: מערבבים אנזימים הטרוזיגוטיים עם חומרי הגנה לייבוש-הקפאה כגון סוכרוז ומניטול, יבשים בהקפאה ב-80 מעלות וממיסים ב-PBS עם pH 7.4 ליציבות אופטימלית.
הכנת מיקרוספירה ארוכת טווח: קופולימר PLGA (פולי (חומצה חלבית גליקולית) משמש לעטוף את האנזים ההטרוזיגוטי, להשגת שחרור ממושך למשך 14 ימים.
אימות חוץ גופית ו-in vivo
בדיקת פעילות חוץ גופית
פרמטרים קינטיים של האנזים: ה-Km (0.12 mM) ו-Vmax (150 nmol/min/mg) של האנזים ההטרוזיגוטי עבורהזרקת ניקוטינמיד ריבוסידנקבעו, שהיו טובים משמעותית מהפראי -סוג P. furiosus NRK (Km=0.5 mM, Vmax=80 nmol/min/mg).
ניסוי תאים: בתאי כבד HepG2, רמת NAD ⁺ בקבוצת הטיפול באנזים ההטרוזיגוטיים הייתה גבוהה פי שלושה מזו בקבוצת הטיפול ב-NR בלבד, ולא גרמה לציטוטוקסיות (קצב שחרור LDH<5%).
אימות מודל בעלי חיים
מודל עכבר מזדקן: עכברי C57BL/6 בני 18 חודשים הוזרקו תוך צפק עם אנזים הטרוזיגוטי (5 מ"ג/ק"ג/שבוע) למשך 8 שבועות. לאחר 8 שבועות, רמת NAD ⁺ בכבד עלתה ב-40%, והפעילות של קומפלקס שרשרת נשימה המיטוכונדריאלי התאוששה לרמה של עכברים צעירים.
מודל מיופתיה מיטוכונדריאלי: לאחר הזרקת אנזימים הטרוזיגוטיים לעכברי נוקאאוט Sco2, כוח השרירים גדל ב-25% וסיבולת הפעילות הגופנית התרחבה ב-30%.
אתגרים ופתרונות מרכזיים
בעיות אימונוגניות
אתגר: רצפים הטרולוגיים של אנזימים ארכאיים עשויים לעורר תגובות חיסוניות של המארח (כגון ייצור של נוגדנים עמידים לתרופות, ADA).
שינוי הומניזציה: שימוש בתכנון-ממוחשב (Rosetta) כדי להחליף את חומצות האמינו של פני השטח של אנזימים archaea בשיירים אנושיים-בשכיחות גבוהה (כגון החלפת L102 של P. furiosus NRK ב-V102 של NRK1 אנושי).
אינדוקציה לסובלנות חיסונית: לפני ההזרקה הראשונה, אנזים הטרוזיגוטי במינון נמוך (0.1 מ"ג/ק"ג) במינון נמוך (0.1 מ"ג/ק"ג) זוכה מראש כדי לגרום להתרחבות של תאי T מווסתים (Treg).
יציבות אנזים ומחצית חיים
אתגר: ישנם פרוטאזות מרובות בסרום של יונקים, כגון Neutrophil elastase, אשר עלול לפרק אנזימים הטרוזיגוטיים.
מוטציה כיוונית: החדרת פרולין (P) באתר ביקוע הפרוטאזות של אנזים הטרוזיגוטי (כגון K150-R151 של NRK1 אנושי) כדי לחסום את המחשוף.
אסטרטגיית חלבון פיוז'ן: איחוי האנזים ההטרוזיגוטי עם תחום מקשר אלבומין בסרום (כגון Domain III של HSA), תוך ניצול היציבות הטבעית של אלבומין כדי להאריך את מחצית החיים-.
חוסר איזון של ויסות מטבולי
אתגר: תוספת יתר של NR עשויה להוביל לחוסר איזון ביחס NAD ⁺/NADH, לעורר עקה חמצונית.
עיצוב עיכוב משוב: הכנס את תחום הקישור NAD ⁺ של יונק SIRT3 לתוך האנזים ההטרוזיגוטי, והוריד אוטומטית את פעילות האנזים כאשר רמות NAD ⁺ גבוהות מדי.
מתן משולב: משמש בשילוב עם נוגדי חמצון (כגון N-אצטילציסטאין, NAC) לשמירה על איזון חיזור תאי.
צווארי בקבוק בייצור בקנה מידה גדול
אתגר: רמת הביטוי של אנזימים ארכאיים נמוכה (בדרך כלל<10 mg/L), making it difficult to meet clinical needs.
אופטימיזציה של קודונים: החלף קודונים נדירים של גנים ארכאיים בקודונים בתדירות גבוהה- של שמרים/יונקים (כגון החלפת AGG ב-CGA).
תסיסה בצפיפות גבוהה: שימוש בביוריאקטור זלוף (כגון Xcellerex XDR-500) להגברת הייצור של אנזימים הטרוזיגוטיים ליותר מ-50 מ"ג/ליטר.
סיכויי עתיד
יישומים רפואיים מדויקים
טיפול מודרך גנוטיפ: על ידי זיהוי פולימורפיזם גן NRK1/2 של המטופל (כגון rs12792273), התאמה אישית של המינון ותדירות ההזרקה של אנזימים הטרוזיגוטיים.
מסירה ספציפית לרקמות-: שימוש בטכנולוגיית אנזימי נוגדנים (AEC), מסירה ממוקדת של אנזימים הטרוזיגוטיים לכבד (נוגדן ASGPR) או למוח (נוגדן TfR).
מערכת שיתוף פעולה רב אנזימים
בניית מערכת אנזימים היברידית של שרשרת מלאה של "המרה של NR סינתזה":
סינתאז NR: איחוי סינתאז NR מהארכאה Methanococcus janaschii עם NAMPT אנושי כדי להשיג המרה ישירה מ-NAM ל-NR.
חיישן NAD ⁺: הצגת מתג מבוקר אור (כגון תעלת יונים רגישות לאור) כדי לווסת באופן דינמי את פעילותם של אנזימים הטרוזיגוטיים באמצעות הקרנת אור כחול.
מסלול המרה קליני
ניסוי שלב I: הסלמה במינון בודד (0.1-10 מ"ג/ק"ג) במתנדבים בריאים, ניטור פרמקוקינטיקה (PK) ופרמקודינמיקה (PD).
ניסוי שלב II: הערכת השפעת השיפור של הזרקת אנזים הטרוזיגוטי על סובלנות פעילות גופנית וחוזק שרירים בחולים עם מחלות מיטוכונדריה.
ניסוי שלב III: ניסוי רב-מרכזי, אקראי, כפול-סמיות לאימות בטיחותו ויעילותו-לטווח ארוך.
שאלות נפוצות
האם זה 'יחיד' או 'רב'? --לפחות שלושה "שיבוטים" קריסטל
+
-
ניקוטינמיד ריבוסיל כלוריד (NRCl) קיים בצורות גבישיות שונות ויש לו תכונות פיזיקוכימיות מגוונות. לפחות שלוש צורות גבישים דווחו ואופיינו עד כה:
גביש צורות A ו-B: שניהם פולימורפים אמיתיים של חומרים נטולי מים.
צורת גביש C: זוהי צורה פסאודו פולימורפית של מתנול סולבאט.
דירוג יציבות: הקשר היציבות הפיזיקלי נקבע, ביניהם צורת הגביש B אושרה כצורת הגביש היציבה ביותר, ומבנה הגביש שלו נקבע על ידי ניתוח עקיפה של קרני X- של גביש יחיד. משמעות הדבר היא שלאבקות NR ממקורות שונים עשויים להיות הבדלים נסתרים ביציבות בשל צורות הגביש השונות שלהן.
מהי נקודת ההיתוך שלו בדיוק? --התשובה חבויה ב'פירוק לפני ההמסה'
+
-
הספרות לא מדווחת על "נקודת התכה", רק "טווח התכה+פירוק". המחקר השתמש בקלורימטריית סריקה דיפרנציאלית (DSC) בשילוב עם ספקטרוסקופיה של מימן תהודה מגנטית גרעינית (¹ H NMR) כדי לגלות שניקוטינמיד ריבוסיל כלוריד מתפרק במהלך ההמסה. מנגנון קור: "נקודת ההיתוך" שאתה מודד היא למעשה נקודת ההתחלה של תגובת פירוק תרמית, ולא מעבר פשוט של פאזה נוזלית-. לכן, יש לתאר את האירוע התרמי שלו כ"התכה מלווה בפירוק" ולא כנקודת התכה קבועה.
למה זה "בסדר" על המדף אבל "מתאבד" בבטן?
+
-
הידרוליזה מזורזת אלקלינית מתרחשת בנוזל מעי מדומה, מייצרת את "האויב הארכי" ניקוטינמיד. מנגנון הפירוק העיקרי הוא הידרוליזה מזורזת אלקליין: NRCl מתפרק במהירות בנוזל מעי מדומה (pH קרוב לבסיס נייטרלי), מתפרק לניקוטינאמיד וריבוז. אפילו פחות פופולרי הוא שתוצר הפירוק ניקוטינמיד יכול לנטרל את ההשפעה של NR על הגדלת NAD ⁺. אז, NR לא רק צריך למנוע חומצת קיבה, אלא גם נוזל מעיים - הפורמולה צריכה להגן עליו ולמנוע יצירת תוצרי פירוק שגורמים ל"תגובת הבור" הזו.
מדוע הערכת הבטיחות שלה מראה סלחנות כלפי נשים בהריון?
+
-
גבול חשוף (MoE) 76 לעומת 100- כמעט לא מספיק. חוות הדעת משנת 2019 של הרשות האירופית לבטיחות מזון (EFSA) קובעת כי:
למבוגרים רגילים: בהתבסס על מחקרי רעילות במינונים חוזרים בחולדות ובכלבים, גבול החשיפה (MoE) הנגזר הוא 70, הנחשב בטוח מספיק.
עבור נשים הרות ומניקות, ה-MoE הנגזר ממחקרי רעילות התפתחותית בחולדות הוא 76. בשל היעדר נתונים שיכולים להוכיח שערכים מתחת ל-100 מקובלים, 76 נחשב לא מספיק.
מסקנה: כסוג חדש של מזון, NR בטוח למבוגרים רגילים (גבול עליון מומלץ של 300 מ"ג ליום), אך לנשים הרות ומניקות, הצריכה הבטוחה המומלצת מופחתת ל-230 מ"ג ליום. זה לא רעיל, פשוט מרווח הבטיחות אינו רחב מספיק.
מלבד אנטי-הזדקנות, מהי ה"זהות הנסתרת" שלו בתחום הייצור הביולוגי?
+
-
זהו "מוצר כוכב" של תסיסה יעילה בביולוגיה סינתטית, עם תפוקה של עד 11.33 גרם/ליטר. מחקר אחרון (2023) על השינוי השיטתי של Bacillus licheniformis:
הפקעת גני השפלה (deoD/pupG) מונעת פגיעה ב-NR.
הוצאת מסלול תוצר הלוואי (pncA) מפחית את ייצור החומצה הניקוטינית.
ביטוי יתר של נוקלאוטידאז (YfkN) מקדם את ההמרה של NMN מבשר ל-NR.
בפעם הראשונה, הוכח כי משאבת הפלח MdtL (שמקורה ב-Escherichia coli) יכולה לקדם משמעותית הפרשת NR.
בסופו של דבר, הזן האופטימלי השיג תשואה של 11.33 גרם/ליטר ושיעור המרה של 0.91 מול/מול ניקוטינמיד NR בצלוחיות שייק, שהוא גם מוצר יעד חשוב למפעלי תאים מיקרוביאליים.
תגיות פופולריות: הזרקת nicotinamide riboside, ספקים, יצרנים, מפעל, סיטונאי, קנייה, מחיר, בתפזורת, למכירה