Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd היא אחת היצרניות והספקיות המנוסות ביותר של 3xflag peptide cas 402750-12-3 בסין. ברוכים הבאים לסיטונאי בתפזורת גבוהה באיכות גבוהה 3xflag פפטיד cas 402750-12-3 למכירה כאן מהמפעל שלנו. שירות טוב ומחיר סביר זמינים.
3XFLAG פפטידהוא רצף סמני פפטידים חשוב בשימוש נרחב בתהליכי ביטוי וטיהור חלבונים במחקר ביו-רפואי. נוסחה מולקולרית C120H169N31O49S, CAS 402750-12-3. מורכב מ-23 חומצות אמינו, הרצף שלו מכיל שלושה מוטיבים חוזרים של Asp Tyr Lys Xaa Xaa Asp, המעניקים לו תכונות מבניות ספציפיות.
בעל מסיסות טובה בממסים ספציפיים. לדוגמה, ב-DMSO, המסיסות שלו גבוהה, מה שהופך אותו נוח לפעולות וניסויים בתמיסה. בנוסף, זה יכול גם להשיג אפקט פירוק טוב במים באמצעות חימום עדין. יש לו גם כמה מאפיינים מיוחדים. לדוגמה, יש לו אנטיגניות ותגובתיות טובה, והוא יכול להיקשר לנוגדנים ספציפיים נגד FLAG. יכולת הקישור הזו הופכת אותו ליישום נרחב בניסויים כמו משקעים חיסוניים. על ידי קשירה תחרותית לנוגדני Anti FLAG, החלבון המבוטא FLAG היתוך הנקשר לנוגדני Anti FLAG יכול להיעלם במהלך משקעים חיסוניים, ובכך להשיג לוקליזציה, זיהוי וטיהור של חלבון המטרה.
|
פקקי בקבוקים ופקקים מותאמים אישית:
|
|


|
נוסחה כימית |
C120H169N31O49S |
|
מסה מדויקת |
2860 |
|
משקל מולקולרי |
2862 |
|
m/z |
2861 (100.0%), 2860 (77.0%), 2862 (32.9%), 2862 (31.4%), 2863 (22.1%), 2862 (11.5%), 2863 (10.1%), 2861 (8.8%), 2864 (8.1%), 2862 (7.8%), 2863 (7.4%), 2863 (5.3%), 2863 (4.5%), 2862 (3.5%), 2864 (3.3%), 2864 (3.2%), 2865 (2.2%), 2865 (2.1%), 2864 (2.1%), 2862 (1.9%), 2862 (1.9%), 2861 (1.5%), 2864 (1.5%), 2861 (1.4%), 2864 (1.4%), 2863 (1.2%), 2864 (1.2%) |
|
ניתוח אלמנטים |
C, 50.36; H, 5.95; N, 15.17; O, 27.39; S, 1.12 |

3XFLAG פפטידהוא תג המשמש בחקר חלבונים, המורכב מ-8 חומצות אמינו עם הרצף DYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDK. תפקידו העיקרי הוא לשמש כסמן לביטוי וטיהור חלבון, לספק אמצעי נוח ויעיל במחקר.

1. טיהור זיקה:
ניתן להשתמש בו כתווית לטיהור חלבון, ובאמצעות הזיקה הגבוהה שלו לנוגדנים אנטי FLAG, ניתן לטהר בקלות את חלבון המטרה. בדרך כלל, חלבון היעד עובר העברה משותפת לתאים עם וקטור ביטוי המכיל 3X FLAG PEPTIDE, ולאחר מכן מטוהר על ידי זיקה באמצעות נוגדנים אנטי FLAG כדי להשיג במהירות וביעילות חלבון מטרה בטוהר גבוה.
2. בדיקה אימונולוגית:
בשל האימונוגניות הגבוהה שלו, ניתן להשתמש בו כדי לזהות ביטוי חלבון ולוקליזציה. על ידי שימוש בנוגדנים ספציפיים נגד FLAG, ניתן לבצע טכניקות ניסיוניות כגון אימונובלוטינג וצביעת אימונופלואורסצנציה כדי לזהות במהירות ובדייקנות את רמת הביטוי וההפצה של חלבוני המטרה.

3. סינון שיבוט:
זה יכול לשמש גם לנוחות של בדיקת שיבוט חלבון. בתהליך הבנייה של וקטורי ביטוי חלבונים, חיבור רצף הגנים של חלבון המטרה עם רצף ה-3XFLAG יכול להקל על הסקר של שיבוטים חיוביים עם חלבון המטרה באמצעות זיהוי חיסוני ושיטות אחרות, ובכך להאיץ את תהליך חקר תפקודי החלבון.
4. משקעים חיסוניים:
זה יכול לשמש גם עבור ניסויים חיסוני חלבון. על ידי קשירת חלבונים המכילים 3X FLAG PEPTIDE תגיות לנוגדנים אנטי FLAG, ולאחר מכן שימוש בחומרי ספיחה כגון חלבון A/G agarose או חרוזים מגנטיים, ניתן לזרז באופן סלקטיבי את חלבון המטרה ושותפיו לאינטראקציה מתמציות תאים כדי לחקור את רשת האינטראקציה של החלבון.


5. בדיקת תרופות:
זה יכול לשמש גם במחקר סקר תרופות. על ידי שילוב של תג 3X FLAG PEPTIDE עם החלבון המעניין, ניתן להשיג סינון-תפוקה גבוהה של החלבון. ניתן להשתמש בשיטת סקר זו כדי לגלות מטרות תרופות חדשות, להעריך אינטראקציות של חלבון תרופתי, וכן הלאה.
6. מחקר תפקוד חלבון:
הכנסת התוויות אינה משפיעה באופן משמעותי על המבנה והתפקוד הטבעיים של חלבונים, ולכן ניתן להשתמש בהם כדי לחקור את התפקודים הביולוגיים, לוקליזציה תת-תאית, אינטראקציות והעברת אותות של חלבונים. על ידי הצגת תג 3X FLAG PEPTIDE, ניתן לבצע מחקר מעמיק על המאפיינים הביולוגיים של חלבונים, מה שעוזר לחשוף את מנגנוני הפעולה שלהם בביולוגיה ובפיזיולוגיה התאית.


3XFLAG פפטידהוא פפטיד המכיל 8 חומצות אמינו, עם הרצף DYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDK. הוא משמש בדרך כלל כתג חלבון לטיהור נוח, זיהוי ומחקר של חלבוני מטרה. בתהליך הביוסינתזה ניתן להכין אותו באמצעות סינתזה כימית או שיטות הנדסה גנטית. להלן השלבים המפורטים של שיטות הנדסה גנטית:
1. עיצוב וסנתזה של גנים:
ראשית, יש צורך לעצב גן מלאכותי המכיל את רצף 3X FLAG PEPTIDE. גן זה צריך להכיל את רצף 3X FLAG PEPTIDE, כמו גם מקדמים, מסיימים וסמני סלקציה מתאימים (כגון גנים לסובלנות לאנטיביוטיקה). עיצוב הגנים צריך לשקול את המאפיינים וצרכי הביטוי של מארח היעד.
2. שיבוט גנים:
לאחר מכן, הגנים המלאכותיים המעוצבים ישובטו לוקטורי ביטוי מתאימים. וקטורים נפוצים כוללים פלסמידים, וקטורים ויראליים וכו'. תהליך השיבוט כולל בדרך כלל את השלבים הבאים:
-הגברת PCR: שימוש בתגובת שרשרת פולימראז (PCR) כדי להגביר את רצף גן היעד מ-DNA של תבנית.
-עיכול וחיבור: מוצרי PCR מתעכלים עם וקטורי ביטוי באמצעות אנדונוקלאזות הגבלה, ולאחר מכן מחוברים זה לזה על ידי ליגזות DNA.
-טרנספורמציה: הפיכת וקטור הביטוי המחובר למארחים חיידקיים כגון Escherichia coli ליצירת פלסמיד רקומביננטי.
-זיהוי: פלסמידים רקומביננטיים זוהו באמצעות PCR, עיכול אנזימים, רצף DNA ושיטות אחרות כדי לאשר שגן היעד שובט בהצלחה לוקטור.
3. חלבון יעד ביטוי:
העבירו את וקטור הביטוי שנבנה לתאי מארח מטרה, כגון תאי יונקים, תאי שמרים, תאי חרקים וכו'. בתוך תאים, וקטור הביטוי מועתק ל-mRNA ולאחר מכן מתורגם לחלבונים . 3X FLAG PEPTIDE יבוא לידי ביטוי יחד עם חלבון המטרה כתג חלבון.
4. מיצוי חלבון:
אסוף תאים שעברו טרנספקציה ובצע פיצול תאים, צנטריפוגה וטיפולים אחרים כדי להשיג את כל תמצית החלבון.
5. חלבון מטוהר:
באמצעות טכניקות טיהור זיקה כגון אימונו-פריפפיטציה וכרומטוגרפיה זיקה, חלבוני מטרה המכילים 3X FLAG PEPTIDE טוהרו מהתמצית הכוללת. זה בדרך כלל כרוך בקישור נוגדנים נגד FLAG לחלבונים המכילים 3X FLAG PEPTIDE, ולאחר מכן הפרדתם באמצעות עמודות כרומטוגרפיה זיקה או חרוזים מגנטיים.
6. זהה חלבונים:
החלבון המטוהר זוהה וכומת על ידי אלקטרופורזה של ג'ל SDS-PAGE, אימונובלוטינג, ספקטרומטריית מסה וטכנולוגיות אחרות כדי להבטיח את הטוהר והשלמות שלו.
תגובות שליליות
במחקר ביו-רפואי ובניסויים הקשורים לחלבונים, פפטידי תג ממלאים תפקיד מכריע. הם יכולים לסייע לחוקרים בטיהור, איתור ואיתור חלבוני מטרה, ולקדם מאוד את הפיתוח של מדע החלבונים.3XFLAG פפטידהוא פפטיד תג נפוץ ונפוץ המורכב משלושה רצפי תג חוזרים ונשנים של FLAG. תג FLAG עוצב במקור על ידי Hopp et al. ב-1988, ומאוחר יותר התפתח לגרסאות כמו 3XFLAG, שיש להן זיקה וסגוליות גבוהות ויכולות להיקשר לנוגדנים ספציפיים, מה שמקל על בידוד וזיהוי לאחר מכן. למרות ש-3XFLAG הביא הרבה נוחות בניסויים, כמו סוכנים ביולוגיים אחרים, הוא עלול גם לגרום לכמה תגובות שליליות.
תגובות לוואי הקשורות למערכת החיסון
אימונוגניות
אימונוגניות מתייחסת ליכולת של חומר לעורר את המערכת החיסונית של הגוף לייצר תגובה חיסונית. 3XFLAG, כמקטע פפטיד אקסוגני, עשוי להיות מזוהה על ידי המערכת החיסונית של הגוף כמרכיב "לא עצמי", ובכך לעורר תגובה חיסונית. למרות שרצף ה-3XFLAG קצר יחסית, במקרים מסוימים הוא עדיין עשוי להפעיל תאי B ותאי T, מה שיוביל לייצור נוגדנים. נוגדנים אלו לא רק נקשרים ל-3XFLAG החופשי, אלא עשויים גם לזהות ולהיקשר לחלבוני היתוך המבטאים את תג ה-3XFLAG, מה שמשפיע על התפקוד הנורמלי וההפצה של חלבון ההיתוך.
תגובות אלרגיות
תגובה אלרגית היא תגובה חיסונית לא תקינה הנגרמת עקב רגישות יתר של מערכת החיסון לאלרגנים מסוימים. אנשים בודדים עשויים לחוות תגובות אלרגיות בעת שימוש ב-3XFLAG לצורך ניסויים או טיפול. חומרת הסימפטומים של תגובות אלרגיות משתנה. מקרים קלים עשויים להופיע עם תסמינים מקומיים כגון גירוד, פריחה ואריתמה, בעוד שמקרים חמורים עלולים לעורר תגובות אלרגיות מערכתיות כגון הלם אנפילקטי, המאופיינת בירידה חדה בלחץ הדם, קשיי נשימה ואובדן הכרה, המהווים איום רציני על בטיחות החיים.
תגובות אלרגיות
מנגנון התגובות האלרגיות קשור בעיקר לנוגדני IgE במערכת החיסון. כאשר הגוף בא לראשונה במגע עם 3XFLAG, המערכת החיסונית מזהה אותו כאלרגן ומגרה תאי B לייצר נוגדני IgE ספציפיים. נוגדני IgE אלו מתחברים אל פני השטח של תאי פיטום ואאוזינופילים. כאשר הגוף בא שוב במגע עם 3XFLAG, הוא נקשר לנוגדני IgE על פני התא, גורם לתאי פיטום ואאוזינופילים לשחרר מתווכים ביו-אקטיביים כגון היסטמין וליקוטריאנים, מה שמוביל להופעת תסמינים אלרגיים.
סיכון למחלות אוטואימוניות
חשיפה ארוכת טווח או חוזרת ל-3XFLAG עלולה להגביר את הסיכון לפתח מחלות אוטואימוניות. מחלות אוטואימוניות מתייחסות לסוג של מחלה שבה המערכת החיסונית של הגוף תוקפת בטעות את הרקמות והאיברים של עצמה, וכתוצאה מכך לנזק לרקמות ולפגיעה תפקודית. 3XFLAG עשוי לגרום למערכת החיסון לייצר נוגדנים צולבים ותאי T באמצעות מנגנון הדמיה מולקולרית, כאשר רצף חומצות האמינו בגוף עצמו דומה לרצף של חלבונים מסוימים בגוף.

תאי חיסון ונוגדנים אלו לא רק תוקפים את ה-3XFLAG הזר, אלא גם פוגעים בשוגג ברקמות הנורמליות של הגוף, מה שמוביל למחלות אוטואימוניות. לדוגמה, מחלות אוטואימוניות מסוימות כגון זאבת אדמנתית מערכתית ודלקת מפרקים שגרונית עשויות להיות קשורות לתגובות אוטואימוניות הנגרמות על ידי חומרים אקסוגניים. למרות שכרגע אין ראיות ברורות המצביעות על כך ש-3XFLAG גורם ישירות למחלות אוטואימוניות, לא ניתן להתעלם מהסיכון הפוטנציאלי הזה.
ההשפעה על תפקוד הסלולר
בכמה מחקרים ניסיוניים, נמצא כי לריכוזים גבוהים של 3XFLAG עשויים להיות השפעות רעילות על תאים. הביטויים של ציטוטוקסיות כוללים שינויים במורפולוגיה של התא, שיבוש שלמות קרום התא, שינויים בפעילות האנזים התוך-תאי ועיכוב שגשוג התא. מנגנון הפעולה שלו עשוי להיות קשור לאינטראקציה בין 3XFLAG לבין קרום התא. בשל המטען השלילי החזק של 3XFLAG,

הוא עשוי להיקשר לרכיבים טעונים חיובית על קרום התא באמצעות אינטראקציות אלקטרוסטטיות, לשנות את החדירות והנזילות של קרום התא, להוביל לדליפה של חומרים תוך-תאיים או לכניסה של חומרים מזיקים מבחוץ, ובכך להשפיע על התפקודים הפיזיולוגיים התקינים של התא. בנוסף, 3XFLAG עשוי גם להיכנס לחלק הפנימי של התאים, להפריע למסלולי איתות, לסינתזת חלבון ולתהליכים אחרים, ולהחמיר עוד יותר את הנזק לתאים.
השפעות על מסלולי איתות סלולריים
3XFLAG עשוי להפריע למסלולי איתות תוך תאיים ולהשפיע על פעילות פיזיולוגית תקינה של תאים. מסלול האיתות הסלולרי הוא כינוי כולל לסדרה של אירועים מולקולריים שבהם תאים מגיבים לגירויים חיצוניים, מווסתים תהליכים חשובים כמו צמיחת תאים, התמיינות ואפופטוזיס. 3XFLAG עשוי להפריע לשידור הנורמלי של מסלולי איתות על ידי אינטראקציה עם מולקולות מפתח במסלול האותות, ולשנות את הפעילות או רמות הביטוי מולקולות.


לדוגמה, הוא עשוי להיקשר לקולטנים על פני התא, לעכב באופן תחרותי את הקישור של ליגנדים טבעיים לקולטנים ולחסום העברת אותות; לחלופין, הוא יכול להיכנס לתא ולהיקשר לחלבוני העברת אותות, להשפיע על זרחון חלבון, דה-פוספורילציה ותהליכי שינוי אחרים, להפריע להעברת אותות ולהגברה. הפרעה זו למסלולי איתות תאיים עלולה להוביל לחוסר תפקוד תאי, להשפיע על תהליכים כמו התפשטות תאים, התמיינות ואפופטוזיס, אשר בתורם עלולות להשפיע לרעה על ההתפתחות והתפקוד הנורמלי של רקמות ואיברים.
השפעות על חילוף החומרים התאי
מטבוליזם תאי הוא המונח הכללי לסדרה של תגובות כימיות המתרחשות בתוך תאים, ומספקות אנרגיה ובסיס חומרי לפעילויות החיים התאיות. 3XFLAG עשוי להשפיע על תהליכים מטבוליים בתא, להפריע לייצור האנרגיה התאית ולסינתזת החומרים. לדוגמה, זה עשוי להשפיע על תפקוד המיטוכונדריה, שהם האתרים העיקריים לנשימה אירובית והפקת אנרגיה בתאים . 3XFLAG עשוי לשנות את החדירות והפוטנציאל של הממברנה המיטוכונדריה על ידי אינטראקציה עם חלבונים או שומנים על הממברנה, להשפיע על תפקוד שרשרת הנשימה המיטוכונדריאלית וסינתזת ATP,

מה שמוביל לאספקת אנרגיה סלולרית לא מספקת. בנוסף,3XFLAG פפטידעלול גם להפריע לתהליכים תוך תאיים כמו חילוף החומרים של גלוקוז ומטבוליזם שומנים, להשפיע על איזון סינתזה ופירוק חומרים בתאים, ולהשפיע לרעה על תפקודים פיזיולוגיים תקינים של תאים
שאלות נפוצות
מה זה 3X FLAG?
+
-
פפטיד 3X FLAG הוא פפטיד סינטטי של 23 שאריות חומצות אמינו. מוטיב Asp-Tyr-Lys-Xaa-Xaa-Asp חוזר על עצמו שלוש פעמים בפפטיד. שמונה חומצות אמינו בקצה C-מרכיבות את רצף ה-FLAG הקלאסי (Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys).
מה ההבדל בין תג-דגל ל-3xflag?
+
-
תג-דגל הוא רצף בודד בן 8 חומצות אמינו בשימוש נפוץ ביישומי משקעים חיסוניים, כתם מערבי ויישומים אימונופלואורסצנטי. לעומת זאת, תג 3x Flag- מכיל 22 חומצות אמינו, מה שמעניק לו זיקה גדולה יותר לנוגדני דגל-, והופכים אותו למועיל במיוחד עבור תהליכי עבודה לטיהור חלבונים.
איך ממיסים 3X FLAG?
+
-
להכנת תמיסה, ממיסים ב-TBS (50 מ"מ Tris-HCl, pH 7.4, עם 150 מ"מ NaCl) בריכוז של 5 מ"ג/מ"ל. מנה ואחסן ב-20 מעלות. הקפאה והפשרה חוזרת לא מומלצת.
תגיות פופולריות: 3xflag peptide cas 402750-12-3, ספקים, יצרנים, מפעל, סיטונאי, קנייה, מחיר, בתפזורת, למכירה




